زمان سنجش به طور قابل توجهی از حدود یک ساعت به چند دقیقه با روش جدید گزارش شده RTF-EXPAR کاهش می یابد که از روش بدون رونوشت معکوس (RTF) برای تبدیل استفاده می کند. RNA به DNA به دنبال آن EXPAR (واکنش تقویت نمایی) برای تقویت در دمای واحد.
کنترل نرخ از Covid-19 گسترش به یک استراتژی دقیق و سریعتر تست ویروس نیاز دارد. RT-PCR (واکنش زنجیره ای پلیمراز ترانس کریپتاز معکوس)، دقیق ترین روش آزمایشی که در حال حاضر استفاده می شود، آزمایش دو مرحله ای است که حدود 60 دقیقه برای هر نمونه طول می کشد.
محققان دانشگاه بیرمنگام روش جدیدی را برای تشخیص SARS-CoV-2 گزارش کرده اند. این می تواند آزمایش بسیار سریعتر را امکان پذیر کند و به اندازه کافی حساس است.
تشخیص RNA ویروسی توسط RT-PCR (واکنش زنجیره ای پلیمراز ترانس کریپتاز معکوس) شامل تبدیل RNA ویروسی به DNA مکمل (cDNA) و به دنبال آن تقویت cDNA توسط یک PCR کمی (qPCR) است. سپس cDNA با استفاده از رنگ فلورسنت شناسایی می شود. این تا یک ساعت طول می کشد.
زمان سنجش به طور قابل توجهی از حدود یک ساعت به چند دقیقه با روش جدید گزارش شده RTF-EXPAR کاهش می یابد که از روش بدون رونوشت معکوس (RTF) برای تبدیل RNA به استفاده می کند. DNA به دنبال آن EXPAR (واکنش تقویت نمایی) برای تقویت در دمای واحد. تقویتی که در یک دمای واحد انجام می شود، کلید سرعت است، زیرا از گرمایش و سرمایش طولانی RT-PCR جلوگیری می کند. علاوه بر این، بخش DNA در حال تکثیر در مقایسه با RT-PCR کوچکتر است. از این رو، EXPAR تا 108 رشته محصول DNA را در چند دقیقه تولید می کند. تشکیل دوبلکس مانند روش RT-PCR با استفاده از رنگ فلورسنت SYBR Green نظارت می شود.
جالب توجه است که روش جدید را می توان برای شناسایی چندین بیماری عفونی دیگر ناشی از ویروس های RNA تغییر داد، به عنوان مثال ابولا، RSV و غیره.
منبع (ها):
کارتر و همکاران (2020). تشخیص زیر 5 دقیقه ای RNA SARS-CoV-2 با استفاده از واکنش تقویت نمایی بدون رونویسی معکوس، RTF-EXPAR. پیش چاپ. منتشر شده در medRxiv ارسال شده در 04 ژانویه 2021. DOI: https://doi.org/10.1101/2020.12.31.20248236
***
